Pada 6 Juli 2002, sang ayah, Dhirubhai Ambani meninggal dunia setelah menderita stroke. Karena tidak meninggalkan surat wasiat, Mukesh dan Anil sempat berseteru perihal pembagian harta warisan.
Tak mau tinggal diam, ibu Mukesh dan Anil Ambani campur tangan untuk menghentikan perseteruan tersebut dan membagi perusahaan menjadi dua.
Dari sanalah, Mukesh Ambani mendapatkan perusahaan Reliance Industries Limited dan Indian Petrochemicals Corporation Limited, yang kemudian disetujui oleh Pengadilan Tinggi Bombay pada Desember 2005.
Reliance memicu perang harga telekomunikasi dengan peluncuran telepon 4G dan layanan broadband Jio pada 2016. Saat ini, Reliance memiliki lebih dari 420 juta pelanggan dan siap meluncurkan layanan 5G.
Ambani mengubah Reliance menjadi perusahaan energi hijau. Perusahaan akan menginvestasikan US$ 80 miliar atau US$ 1.200 triliun selama 10-15 tahun ke depan untuk energi terbarukan dan membangun kompleks baru di sebelah kilangnya.
Kini Mukesh Ambani terus melebarkan sayap kesuksesannya melalui putranya Akash yang kini menjadi ketua Reliance Jio. Sedangkan putrinya, Isha mengawasi ritel dan putra bungsu Anant bergerak di bidang bisnis energi terbarukan.